岚枫飘叶
一、基因疫苗的诞生自1796年英国医生琴娜(Jener)首次采用牛痘苗以来，疫苗已在世界范围内被广泛应用，200多年来各种疫苗已经帮助人类战胜了包括天花在内的多种传染病然而，现有的疫苗主要有两种：第一种疫苗是传统疫苗，即弱毒活苗和灭活苗，如鸡新城疫弱毒苗，猪瘟灭活苗，它是直接将无毒或减毒的病原体作为疫苗接种到人或动物体内，刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答，从而预防疾病的发生；第二种疫苗是基因工程苗，它是通过基因工程，先分离得到具有强烈免疫原性但无毒性的抗原蛋白的编码基因，然后导入表达载体中，再在宿主细胞表达出重组抗原蛋白，经分离纯化后的重组抗原蛋白作为疫苗接种如重组乙肝疫苗。但它存在一些不可忽视的缺陷如:灭活疫苗难以诱发细胞免疫，需多次免疫注射;亚单位疫苗免疫原性差;减毒活疫茵存在毒性回升的危险等问题因此，现在对一些传染病仍缺乏相应的安全有效的疫苗 第三代疫苗基因疫苗的问世，为解决这些难题带来了希望基因疫苗（genetic vaccine）又称核酸疫苗(nucleic acid vaccine)或DNA疫苗，是在基因治疗（genetic therapy）技术的基础上发展而来的。基因治疗是从20世纪80年代发展起来用于预防和治疗疾病的最具革命性的生物医学医疗技术，其原理是将人或动物的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或发挥治疗作用，从而达到治疗疾病目的。1990年Wolff JA等在进行基因治疗试验时，以裸DNA注射作对照，结果意外发现裸DNA可被骨骼肌细胞吸收并表达出外源性蛋白。1992年Tang 、 DC等首次证明经基因免疫产生的外源性蛋白质——人生长激素可刺激小鼠免疫系统产生特异性抗体，而且加强免疫后抗体效价增加，从而宣告基因疫苗的诞生。（注：1）概括起来，基因疫苗就是指将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的载体上，然后直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，该抗原蛋白可直接诱导机体产生免疫应答。抗原基因在一定时限内的持续表达，不断刺激机体免疫系统产生应答反应，从而达到预防疾病的目的。二、核酸免疫的作用机理目前对核酸免疫作用机理的认识主要还仅限于理论推测，且多数资料来自基因治疗试验，二者在作用机理上很相似。在基因免疫中，含病原体抗原基因的核酸疫苗被导入宿主细胞，被周围的组织细胞、APC细胞或其它炎性细胞摄取，并在细胞内表达。表达产物作为抗原可能的呈递途径是：肌细胞直接摄入或经T小管和细胞样内陷摄取进入，在外源基因启动子作用下使外源基因表达，使产物在胞内水解酶的作用下分解成长短不一的多肽，其中的一部分被hsp70运到内质网，经网膜上的TAP分子转入膜内与主要组织相容性复合物（MHC）I类结合，最终在细胞膜表面被CDS十细胞识别；另一部分短肽进入溶酶体，与（MHC）Ⅱ分子结合，运到细胞表面被 CD4＋细胞识别。这些多肽含有不同的抗原表位，它们将诱导细胞毒性T淋巴前体、B细胞和特异性辅助T细胞，产生细胞免疫和体液免疫。同时，基因表达可以通过细胞分泌和分裂的方式进入组织细胞间隙，以天然折叠方式被B淋巴细胞识别。核酸免疫后，还可以使肌细胞和抗原递呈细胞被感染，从而使CD4＋和CD8＋细胞亚群活化，产生特异的免疫应答。 CorrM等（1996）的研究表明，从转染DNA得肌肉组织释放出的抗原被APC摄入，运送到管状淋巴结中，在B淋巴细胞和T淋巴细胞表达， I类MHC限制的CTL应答可能主要以这种方式产生。以前曾认为该过程需要内源抗原的表达，但现在的研究表明，只要有外源抗原的存在，也能有效地引起I类MHC限制的CTL应答。 三、基因疫苗质粒载体的构建获得准确的抗原编码基因并将它插入到合适的载体DNA上，是发展基因疫苗的主要工作。1、编码抗原蛋白基因的分离制备DNA疫苗首先要获得编码抗原的基因，一般选择编码病原体表面糖蛋白的基因。抗原蛋白产生后可在宿主体内正确糖基化，从而诱导对病原体的免疫应答反应；对于易变异的病原体，最好选择各种变型都具有的核心蛋白保守的DNA序列，这样可对各种变异的病原体产生免疫应答反应，避免因病原体变异产生的免疫逃避问题。2 目的基因质粒的载体构建基因疫苗大多采用质粒作载体。一般说来，基因疫苗质粒载体至少包括5个主要的部件：（1）细菌复制子，以便质粒DNA在细菌体内复制扩增，得到大量的拷贝，但不能在宿主细胞（真核细胞）中复制；（2）原核生物选择性标记基因，如抗生素抗性基因，以筛选含有质粒DNA的阳性细菌克隆（菌株）；（3）真核生物的启动子、增强子、终止子、内含子等转录调控元件；（4）编码抗原蛋白的目的基因序列；（5）多聚核苷酸信号序列，以保证mRNA翻译时适时终止。另外，基因疫苗质粒载体通常含有一段未甲基化的CpG序列，其具有刺激Th1细胞的免疫活性。四、严重创伤后全身性炎症反应综合征及免疫调节治疗严重创伤后机体免疫功能表现为双向性改变。一方面表现为以吞噬功能和白细胞介素-2（IL- 2）等产生降低为代表的免疫受抑状态；另一方面表现出以全身性炎症反应综合征为特征的过 度炎症反应。正是这二方面共同作用构成了创伤后机体免疫功能紊乱，诱发多器官功能不全综合症（Multiple Organ Dysfunction Syndrome，MODS）。下面就全身性炎症反应综合征和免疫调节治疗作一综述。 
用文字、图形、符号、声频、视频等技术手段记录人类知识的一种载体，或理解为固化在一定物质载体上的知识。现在通常理解为图书、期刊等各种出版物的总和。文献是记录、积累、传播和继承知识的最有效手段，是人类社会活动中获取情报的最基本、最主要的来源，也是交流传播情报的最基本手段。正因为如此，人们把文献称为情报工作的物质基础。在国内国外，都常常可以看到有人把“文献”与“情报”，“文献学”与“情报学”等同起来，虽然这种等同未必适宜，但却反映了文献在情报活动和科学中的极为重要的地位。 区分文献类型或形式有多种方法，其中最主要的是根据载体把其分为印刷型、缩微型、机读型和声像型。（1）印刷型：是文献的最基本方式，包括铅印、油印、胶印、石印等各种资料。优点查可直接、方便地阅读。（2）缩微型：是以感光材料为载体的文献，又可分为缩微胶卷和缩微平片，优点是体积小、便于保存、转移和传递。但阅读时须用阅读器。（3）计算机阅读型：是一种最新形式的载体。它主要通过编码和程序设计，把文献变成符号和机器语言，输入计算机，存储在磁带或磁盘上，阅读时，再由计算机输出，它能存储大量情报，可按任何形式组织这些情报，并能以极快的速度从中取出所需的情报。近年来出现的电子图书即属于这种类型。（4）声像型：又称直感型或视听型，是以声音和图像形式记录在载体上的文献，如唱片、录音带、录像带、科技电影、幻灯片等。 文献在科学和社会发展中所起的作用表现在：（1）是科学研究和技术研究结果的最终表现形式；（2）是在空间、时间上传播情报的最佳手段；（3）是确认研究人员对某一发现或发明的优先权的基本手段；（4）是衡量研究人员创造性劳动效率的重要指标；（5）是研究人员自我表现和确认自己在科学中的地位的手段，因而是促进研究人员进行研究活动的重要激励因素；（6）是人类知识宝库的组成部分，是人类的共同财富。 根据文献内容、性质和加工情况可将文献区分为：一次文献、二次文献、三次文献。一次文献指以作者本人的研究成果为依据而创作的原始文献，如期刊论文、研究报告、专利说明书、会议论文等。二次文献是对一次文献进行加工整理后产生的一类方面，如书目、题录、简介、文摘等检索工具。三次文献是在一、二次文献的基础上，经过综合分析而编写出来的文献，人们常把这类文献称为“情报研究”的成果，如综述、专题述评、学科年度总结、进展报告、数据手册等。与此类似，也有把情报区分成一次情报、二次情报、三次情报的。 构成文献的三个基本要素是:知识、载体和记录 文献综述有两种，一种是“大综述”，就一个领域的文献的总结，经常会发在专门发Review的杂志上，或者是在Handbook里。写这种综述文章的人有许多是权威人物，但也有一些是助教授级别的人写的，但作者一般都是在这个题目上做了相当贡献的人。“大综述”中还有一种“超大综述”（这些提法都是我为了论述方便杜撰的）以前在Bhagawati时代，Bhagwati、Max Corden等人做过一些整个国际贸易理论领域的综述，但这些年我没有见到有谁做类似的东西，现在一般综述都是就作者擅长的一个方面写的，然后集在手册里。另外一些研究生教材，特别是Feenstra的那本，写法很像综述。 另一种是“小综述”，就是论文第一部分Introduction部分的综述。这个综述的目的主要不是为了向其他人介绍前沿，而是为了推出自己的论述和模型，是以述带论，核心功能是定义“Gap"，就是说明现有的研究状况如何，缺在哪里，我准备做的贡献是什么。所以，这种综述并不强求非常全面细致，不是“掉书袋”，而应该侧重介绍与自己的研究直接相关的文献。 对于”大综述“，我觉得我们在没有一点原创性的研究以前最好不要写。没有见过几棵树，谈不上去见森林。我现在有了一点点研究体会之后感觉，一个题目，你没有扎进去之前，许多体会感受都是虚的。以前国内文献搜集有困难，早期出来的一些前沿介绍当然就很有意义。现在你如果真正做研究，文献检索不应该成为很大的困难。所以做二道贩子，将人家研究的东西半懂不懂地编译一下，在真正做研究的人中间也不会有什么市场。至少我自己，我也建议大家，不去看没有原创贡献的作者写的综述文章。即使是原创文章的前沿综述，也有一些问题。前一段时间一个老师给我一些城市经济学的综述，是这个领域的很活跃的一些作者要出的手册，当时这个老师给我的时候，指着其中一章说：This strand is dying。都是最活跃的作者写的在还没有出版的手册上的文献综述，有的就已经要过时了。所以，赶风头永远是赶不上的。 对于“小综述”，这是人人都可以写，而且应该写的。如果你心中有了题目，就应该围绕这个题目去尽量搜集最新的文献，这个风头是绝对应该赶的。我个人看法是不要强求自己去理解整个国际贸易理论发展的脉络，具体题目深入下去，对整个国贸理论有时候有具体而微的全息功效，你自己有时候也会产生有一些格物致知的感受。但是，真正要去理解什么脉络，恐怕不是一下子的工夫。当然，我这里所说的前沿、深入，都是相对而言的，每个人不同的学习阶段，不同的条件和功底，会有不同的成果和收获，只要尽责做了，就是好的。
1。营销人员的基础素质要求 一个成功的营销人员给人的印象首先是热情、自信、善于辞令、仪表端庄、知识广博等，诸如此类的东西正是内心良好心态的一种流露。试想一个自卑、自馁、害怕失败、害怕打击，不求上进的销售人员能表现出上述的洒脱与干练吗？永远不会。良好的心态是在实践中一点点磨练、总结之后的汇总，不是想有就有的，是在经历无数次被拒绝、被打击磨练后才达到的一种境界。往往一个优秀的营销人员的营业额能达到一般人员的二三十倍，这并不稀奇。具备什么样的素质才能取得如此骄人的业绩呢？除了大家公认的吃苦耐劳、擅长社交、有一定的专业素质之外，还应具有以下几种素质要求：1．诚实可靠、认真负责首先诚实可靠，这是对一个营销人员最基本的素质要求。现在无论是企业还是个人都要讲诚信，尤其是在市场经济条件下，在大量的广告充斥市场的氛围中，特别有强调诚信的必要，诚信是营销人员的人格基础。营销的全部工作都是以人为中心进行，营销链涉及厂家、经销商、消费者、市场管理等等。如果营销中的某个环节失去了诚信，就很难良好地运行，凡成功的营销人士都无一例外地靠诚信起家、发展。原微软中国研究院院长李开复在给中国学生的信中说：谈论如何成功，其中第一条就是要坚守诚信、正直的原则。只有有智慧的人才会理解品性的价值。我们国灸公司一直把“追求卓越品质、振兴中华灸法”作为营销宗旨，崇尚“以人为本”，“人才”主导发展的现代企业经营理念。作为国灸的营销人员就要确立以顾客为中心的经营理念，发展“帮助顾客消费”，强化顾客满意的“十全十美”的优质服务，必须是一个忠诚国灸事业的人，不欺上瞒下，不弄虚作假、不好大喜功，作风踏实稳重。反映在个人身上叫道德品质，反映在企业就是讲职业道德。其次是认真负责。对顾客负责，对产品负责，对公司的声誉负责，也是对自己负责。在顾客不满意时，从自身解码，不互相推卸责任、互相埋怨。我们公司在创业之初，凭着销售人员的一股干劲，在全国一下子开办了25个办事处，这二十五个办事处中，涌现了不少业务尖子。像现在湖北市场事业二部的陈军同志，无论是在办事处，还是在公司总部，工作都认真负责，无论他到哪个办事处，这个办事处的业绩就会直线上升，没有认真负责的精神能行吗？还有“爱找麻烦的业务员李小倩”，肯于吃苦的雷想姣，巾帼不让须眉的孙淑东、陶志荣，更有言传身教的副总孟宪涛等等，都是我们营销人员学习的典范，也是国灸公司的骄傲。2、热爱中国灸事业、牢记司训的敬业精神勿庸置疑，一个国家的强盛，离不开爱国的全体人民的努力和创造，一个企业也是如此，没有一批爱岗敬业的员工去努力奋斗，企业的发展犹如无本之木，无源之水。我们的司训是“身为炎黄子孙，复兴是我责任；仰仗公司宏图，追求事业有成；不自私、不疏懒，要上进、要勤奋，为了中国灸法，情愿贡献今生”。短短48个字，却是我们公司从小到大，从弱到强，六年多来文化和精神的沉淀与提炼。它包含了：（一）国家、社会、企业、个人的利益关系。“身为炎黄子孙，复兴是我责任。” 我们同是炎黄子孙，中华民族的生死存亡与我们息息相关，振兴中华是每个炎黄子孙义不容辞的责任。作为国灸公司的一员，爱国的具体行动就是要使祖国的千年灸法发扬光大，我们有中国灸这个产品，中医中药的复兴也就落在了我的肩上。（二）公司因我而兴旺，我为公司而光荣。企业靠的是国家，作为员工靠的当然是企业。公司的近期目标和远景规划，就是我们的宏伟蓝图。每个员工必须围绕这个目标兢兢业业，勤勤恳恳地工作，不怕困难，不怕牺牲，乐于奉献，企业才能实现目标，个人才能事业有成。（三）体现了企业的人文精神。作为一个不怕挫折和困难的企业，它的员工也应该是“不自私、不疏懒，要上进、要勤奋”的具有进取精神的员工。公司允许员工犯错误，允许做得不完美，但不能容忍对错误和不完美熟视无睹。我们要求员工谦虚、务实、上进、肯学、敢拼、敢于面对困难，解决问题。“为了中国灸法，情愿贡献今生”，成功在于细节，成功在于心态。当坚韧的信念成为我们的人生支撑，并愿意为之贡献一切时，还有什么问题不能解决呢？郑州办事处成立的第一批促销员韦家枝，就是爱岗敬业的典型，他肯于吃苦，业绩突出，被任命为小组长。办事果敢、雷厉风行的他在小组实行“严格要求、无情管理”的制度，对事不对人，好几个女孩为他的严厉而开导，“你也是名促销员，何必较真呢！”韦家枝一听火冒三丈，“得过且过不是我的性格，到公司一天就要为公司发展尽一份力。”还有原济南办事处的雷想姣，为了保证办事处每天早上6时活动的顺利开展，除了头天晚上参与同事的交流和小报的发布等工作，返回后还要准备各种备用物品，一阵忙下来，已是深夜，仅5个小时的休息后，又要和同事们同奔战场。一天，她因过度劳累，骑车赶路时不慎摔倒，脸上、胳膊上鲜血直流，牙齿也被磕断了，她爬起来，擦了擦血，拍了拍身上的灰，没事似的赶到晨练点，同事们见了都心疼地劝她看医生、休息，可她说，“没事，轻伤不下火线，现在正是关键时刻，我怎能临阵脱逃呢！”像韦家枝、雷想姣这样的员工不胜枚举，他们是极普通的员工，他们没有震憾人心的豪言壮语，也没有特别荡气回肠的英雄故事，但他们身上表现出的是高度的主人翁意识和无私的奉献精神，正是这些热爱国灸的平凡的人、平凡的事铸就了今天国灸的辉煌事业。3、产品知识丰富过去有的医药企业把产品的作用毫无逻辑的神化，迷惑过很多消费者。但是，今天市场越来越成熟，消费者越来越理性，过分夸张的药理假说，消费者已司空见惯，在不具备专业知识基础上的生编硬造，容易让未来的同类产品堆砌，产生致命的挤压。作为国灸的营销人员，我们要求大家实事求是地宣传我们的产品，大家对产品的起源、发展、性能、特色、治病机理、功效，每个品种各有何特点以及如何贴敷，都要非常熟悉，面对顾客的提问才能对答如流。古老的中华灸法是一整套内病外治的方法，流传达数千年之久，古时曾是上至帝王，下至庶民治病疗疾的上乘之法，只是由于难以适应现代生活节奏的变化而逐渐为现代人所淡忘。中国灸获药械准字号的品种17个，共五大系列六十多个品种，其特点是，一是热疗，药疗加灸疗见效快；二是内病外治无毒副作用。它的治病机理是一方面使造血功能得以增强，同时因为能量激活其它免疫因素，间接增强了中性粒细胞和巨噬细胞的吞噬活性。另一方面，热量使皮肤表面毛孔扩张，大量药物分子快速渗透皮下，循经络直达患部。4、说服能力强、口语表达清晰准确营销人员应有一副好口才，这是关系营销人员能否成功的重要因素。随和豁达，有天赋的亲和力，易动感情，这类人天生对别人感兴趣，喜欢与人交往，容易发现他人的优点，富有同情心，待人真诚。有个30出头的女士，第一次参加公司应聘时就问东问西，和周围所有的陌生人打招呼，根本不把自己当成外人，她第一次来连公司门卫老头姓什么都知道了。她发自内心地希望了解别人，有一种与生俱来的亲和力。并不是为了达到销售业绩去和别人交流，交流本身就让她感到非常高兴。这位女士到公司第一个月就开始出业绩，第二三个月已经非常出色，销售额是他人的十几倍，我们公司原西安办的宋转娣，第一次在陕西省医药工贸公司客流量最多的时候，手里拿着宣传单，叫道：“中国灸免费试贴，买一赠一……”并观察购买对象。恰好五十米开外一位一走一跛的老者走过来，她向他递宣传单并介绍中国灸治疗范围和功效，谁知老者近乎吼叫的陕北话“要能把的我骨质增生治好，我愿出500元来买，你敢向我保证吗？”此时，全场的人都朝这边看，有顾客还围过来。此时，宋转娣的回答将直接影响宣传效果，甚至影响公司的声誉。于是她十分沉着镇定，一边快速发散宣传单，一边微笑着说：“老师傅，我们的产品就是最好的保证，中国灸标本兼治各类疼痛病，对您的骨质增生也不例外，效果特别好，不信您可先试用一贴，30分钟后就有缓解作用。”“真有这样的疗效吗？”老人声音虽然小了些，但仍不相信，小宋说：“我可以向您保证产品的功效，明天还在这儿做活动，您可以找我。”小宋的从容、耐心感化了老人，他说：“好吧，我先试一贴，买一贴，如果效果好，我再买。”见此情景，周围的人也纷纷要试贴。一刹那，中国灸成了抢手货，一会儿，卖出了不少。由此可见，促销员的现场说服力很重要，只要回答得体，就能带来意想不到的效果，即使有心刁难的人也会成为顾客，验证了一句谚语：“买卖不成话不到，话语一到卖三俏。”5、洞察力与应变能力强。作为一个优秀的营销人员，面对当今瞬息万变的市场，就要有敏锐的洞察力和应变能力。有个公司招聘营销人员，由于人多，活动进展很慢。到了中午12时，人们已饥肠辘辘，但又唯恐失去了良机，只好焦急地等待，忍饥挨饿不肯离去。这时，一个也是参加应聘的人买来了一车盒饭和矿泉水，一下子被抢购一空，不仅解决了大家的吃饭问题，而且第一天就掘得了第一桶金，后来这个人理所当然被公司录取了。另外，一个公司招聘营销人员，公司要求应聘者在规定的时间内完成向和尚推销木梳的任务，将木梳卖给和尚，岂不是天方夜谭？有人望而却步，有人饱受艰辛无功而返，然而一位应聘者，却一次推销了1000把木梳。原来，他有意回避了木梳的常用功能，也没有径直找一批和尚做工作，而是不动声色地来到一家香火很旺的佛山宝刹，对主持开展公关，“凡来进香的朝拜者，多有一颗虔诚之心。宝刹应有所馈赠，以示纪念，保佑其平安吉祥，鼓励其多做善事，我正好有一批木梳，加上您超群的书法艺术，不妨刻上‘积善梳’三字，这样的赠品一定受善男信女的垂青！”主持闻之大喜，立即买下了1000把木梳制成“积善梳”，广施“善缘”。以上两则故事对我们每个营销人员应该有所启迪吧！6、锲而不舍的追求及豁达的公关能力。大凡营销人员都有过这样的经历：当你拿着产品向客户推荐时，纵然自己讲得口干舌燥，但客户不屑一顾的神情分明在说，同类产品多的是，谁稀罕你的。这种尴尬的局面在新辟市场时都会发生。这就需要营销人员有锲而不舍的追求和豁达的公关能力。在这方面，原三门峡办事处的陈家立同志为我们树立了好榜样。初到三门峡，人生地不熟，要去开辟一个陌生的市场，其难度可想而知。陈家立第一次到药店铺货，当时向一位营业员讲明来意后，这位小姐硬邦邦地甩了一句：“李经理不在，以后再说吧。”就和其它营业员聊天去了，将陈家立凉在一边。面对闭门羹，是走还是留呢？屈辱和自卑涌上心头。但这个药店火爆的生意让他停下了脚步，中国灸要打开在三门峡的市场，绝不能放过这个大药店。这时，陈家立无意之中听见两个营业员讲李经理的妈妈治病住院的事，说者无心，听者有意，凭直觉，陈家立觉得他们谈的李经理就是这个药店的李经理。于是一个“曲线救国”的计划在陈家立的脑海中形成。第二天，陈家立再次来到这个药店，向另一个营业员打听李经理在不在，营业员以为陈家立和李经理是熟人或朋友，就告诉了他，李经理此时去医院看妈妈去了。陈家立又通过打听，掌握了李的妈妈所在的医院和病床号，提着礼品去医院，不巧，李经理走了。陈家立于是陪李经理的妈妈闲聊，并做些服务工作，李的妈妈很高兴，给他讲了李的趣事，并从中知道了李每天看望妈妈的时间。第三天，陈家立估计李经理快到医院，他买了一束鲜花，直奔医院，这次很自然地见到了李经理。在走出医院时，陈家立向李经理说明了来意，并诚恳地说，在这陌生的城市需要李经理帮忙。陈家立的真诚和坦率终于打动了这位河南人，分手时友好地握手。就这样，陈家立和李经理成了好朋友，中国灸也因此摆上了该药店的专柜。陈家立的经历告诉我们，只要你做有心人，办法总比困难多，如果当时陈家立转身走了，那就没有这个故事了。有时，失败与成功仅一步之遥。因此营销人员的总体素质的培养、充实与完善，不仅仅是自善其身，更重要的是为总体营销开发积蓄力量，提高资质。
