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一、基因疫苗的诞生自1796年英国医生琴娜(Jener)首次采用牛痘苗以来，疫苗已在世界范围内被广泛应用，200多年来各种疫苗已经帮助人类战胜了包括天花在内的多种传染病然而，现有的疫苗主要有两种：第一种疫苗是传统疫苗，即弱毒活苗和灭活苗，如鸡新城疫弱毒苗，猪瘟灭活苗，它是直接将无毒或减毒的病原体作为疫苗接种到人或动物体内，刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答，从而预防疾病的发生；第二种疫苗是基因工程苗，它是通过基因工程，先分离得到具有强烈免疫原性但无毒性的抗原蛋白的编码基因，然后导入表达载体中，再在宿主细胞表达出重组抗原蛋白，经分离纯化后的重组抗原蛋白作为疫苗接种如重组乙肝疫苗。但它存在一些不可忽视的缺陷如:灭活疫苗难以诱发细胞免疫，需多次免疫注射;亚单位疫苗免疫原性差;减毒活疫茵存在毒性回升的危险等问题因此，现在对一些传染病仍缺乏相应的安全有效的疫苗 第三代疫苗基因疫苗的问世，为解决这些难题带来了希望基因疫苗（genetic vaccine）又称核酸疫苗(nucleic acid vaccine)或DNA疫苗，是在基因治疗（genetic therapy）技术的基础上发展而来的。基因治疗是从20世纪80年代发展起来用于预防和治疗疾病的最具革命性的生物医学医疗技术，其原理是将人或动物的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或发挥治疗作用，从而达到治疗疾病目的。1990年Wolff JA等在进行基因治疗试验时，以裸DNA注射作对照，结果意外发现裸DNA可被骨骼肌细胞吸收并表达出外源性蛋白。1992年Tang 、 DC等首次证明经基因免疫产生的外源性蛋白质——人生长激素可刺激小鼠免疫系统产生特异性抗体，而且加强免疫后抗体效价增加，从而宣告基因疫苗的诞生。（注：1）概括起来，基因疫苗就是指将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的载体上，然后直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，该抗原蛋白可直接诱导机体产生免疫应答。抗原基因在一定时限内的持续表达，不断刺激机体免疫系统产生应答反应，从而达到预防疾病的目的。二、核酸免疫的作用机理目前对核酸免疫作用机理的认识主要还仅限于理论推测，且多数资料来自基因治疗试验，二者在作用机理上很相似。在基因免疫中，含病原体抗原基因的核酸疫苗被导入宿主细胞，被周围的组织细胞、APC细胞或其它炎性细胞摄取，并在细胞内表达。表达产物作为抗原可能的呈递途径是：肌细胞直接摄入或经T小管和细胞样内陷摄取进入，在外源基因启动子作用下使外源基因表达，使产物在胞内水解酶的作用下分解成长短不一的多肽，其中的一部分被hsp70运到内质网，经网膜上的TAP分子转入膜内与主要组织相容性复合物（MHC）I类结合，最终在细胞膜表面被CDS十细胞识别；另一部分短肽进入溶酶体，与（MHC）Ⅱ分子结合，运到细胞表面被 CD4＋细胞识别。这些多肽含有不同的抗原表位，它们将诱导细胞毒性T淋巴前体、B细胞和特异性辅助T细胞，产生细胞免疫和体液免疫。同时，基因表达可以通过细胞分泌和分裂的方式进入组织细胞间隙，以天然折叠方式被B淋巴细胞识别。核酸免疫后，还可以使肌细胞和抗原递呈细胞被感染，从而使CD4＋和CD8＋细胞亚群活化，产生特异的免疫应答。 CorrM等（1996）的研究表明，从转染DNA得肌肉组织释放出的抗原被APC摄入，运送到管状淋巴结中，在B淋巴细胞和T淋巴细胞表达， I类MHC限制的CTL应答可能主要以这种方式产生。以前曾认为该过程需要内源抗原的表达，但现在的研究表明，只要有外源抗原的存在，也能有效地引起I类MHC限制的CTL应答。 三、基因疫苗质粒载体的构建获得准确的抗原编码基因并将它插入到合适的载体DNA上，是发展基因疫苗的主要工作。1、编码抗原蛋白基因的分离制备DNA疫苗首先要获得编码抗原的基因，一般选择编码病原体表面糖蛋白的基因。抗原蛋白产生后可在宿主体内正确糖基化，从而诱导对病原体的免疫应答反应；对于易变异的病原体，最好选择各种变型都具有的核心蛋白保守的DNA序列，这样可对各种变异的病原体产生免疫应答反应，避免因病原体变异产生的免疫逃避问题。2 目的基因质粒的载体构建基因疫苗大多采用质粒作载体。一般说来，基因疫苗质粒载体至少包括5个主要的部件：（1）细菌复制子，以便质粒DNA在细菌体内复制扩增，得到大量的拷贝，但不能在宿主细胞（真核细胞）中复制；（2）原核生物选择性标记基因，如抗生素抗性基因，以筛选含有质粒DNA的阳性细菌克隆（菌株）；（3）真核生物的启动子、增强子、终止子、内含子等转录调控元件；（4）编码抗原蛋白的目的基因序列；（5）多聚核苷酸信号序列，以保证mRNA翻译时适时终止。另外，基因疫苗质粒载体通常含有一段未甲基化的CpG序列，其具有刺激Th1细胞的免疫活性。四、严重创伤后全身性炎症反应综合征及免疫调节治疗严重创伤后机体免疫功能表现为双向性改变。一方面表现为以吞噬功能和白细胞介素-2（IL- 2）等产生降低为代表的免疫受抑状态；另一方面表现出以全身性炎症反应综合征为特征的过 度炎症反应。正是这二方面共同作用构成了创伤后机体免疫功能紊乱，诱发多器官功能不全综合症（Multiple Organ Dysfunction Syndrome，MODS）。下面就全身性炎症反应综合征和免疫调节治疗作一综述。 
医学生毕业论文的书写方法 选题 选题 选题要尽可能早些。选题早，早做准备，时间充分。 选题要考虑主、客观条件 只有考虑主、客观条件，才能避己之短，用己所长，选择最利于发挥自己聪明才智的课题。比如，您想对"交感胺类药物"进行研究，如果您的生理学、药理学基础好，可从其应用方面选题，可借鉴前人研究成果，从不同侧面进行研究，同样会有突破。如果你的化学及药物化学基础好，可从药物基因方面及配伍方面进行研究，通常药物的基本结构决定药物的作用，取代基因决定作用强度、副作用等。医学领域学科很多，不一一列举，但都可找到其突破口。只有扬长避短才能写出称心的论文来。 选题不要太特殊 选题特殊，往往只知其然，不知其所以然，是写不出好论文的。尽量避开大而复杂的题目，选比较一般的题目。比如"胆囊收缩素一胰泌素"对某一方面的作用研究，这类题目有比较、有借鉴，写起来比较容易。 要摆脱单纯的爱好和趣味 个人的爱好和趣味是选题的一个前题，但是，单纯地从个人兴趣、爱好出发，也是不切实际的。比如你对分子生物学很感兴趣，也是目前医学界关注的问题，但就目前的实验条件及教学计划而暂时还很难写出如意的论文。当然有条件可从某个角度去研究。又如你对"爱滋病研究"很有兴趣，但目前 国内你接触的都是第二手材料，孤立的去研究，是困难的。 选择突破口 选题要找突破口，这个突破口可选择难度较小，而又带有普遍意义的题目，或者易被人忽视的问题，如果有条件，突破口可以选择两门学科的交界处，进行科学的"边缘"研究。作为医学院校学生各门课程都在同步与交叉学习，有较深的理论基础，具有较好的连贯性，比如学习解剖知识较全面之后可以选择"某种外科术式改进探讨"。基础理论融会惯通之后，往往在临床内、外科交界处或其它相关学科交界处做文章容易突破，比如内科侧重于药物治疗，而外科是往往忽视的，"5-羟色胺受体拮抗剂治疗化疗致吐"研究成功即为内科药学与肿瘤科交界处研究成功的典型例子。钙离子拮抗剂的广泛应用亦然。就中医与西医而言，比如中药大黄多种作用，如你从化学分析角度去分析药物的作用机理就是对中医的发展，容易重点突破，写出一定质量的论文。 搜集资料 题目选定之后，就要以题目为中心，作一些踏实的搜集资料工作。 选定一个搜集资料的目录 制定一个搜集资料的目录是写论文的一个重要基础，制定这个目录时要和写论文有经验的前辈交谈，或经导师或教研室有经验的教师指点，也可以请与自己毕业论文题目相近的、论文写得好的毕业生介绍经验，交换意见。 制定搜集材料和目录，可以从现在的文献资料调查入手，既熟悉，又有兴趣。搜集材料的目录可按年代由近溯远，写上调查中得到的有关研究对象的材料。随着计算机广泛应用于文献检索，给作者搜集资料带来很大方便，但这种文献往往是二次文献，笔者建议在此基础上用追溯法查阅一次文献。 摘录与选题有关材料 搜集材料，要多要全、没有遗漏，这是最理想的。但是任何一个问题的研究都有主要材料和次要材料。要围绕核心问题搜集主要材料，有用材料，把它记录下来，摘写出来，对次要材料，放在次要地位处理。 着重搜集第一手材料 写毕业论文，是培养我们严谨的治学态度的一条途径，而要从第一手材料中找根据。对医学院校来说，多去附属医院查病案资料，是很有裨益的。尽管已有现成的科研结果文献，也肯定还有被忽视的空白，要从纵横两个方面去发现空白，从另一个侧面去要相关第一手资料。 对搜集来的资料要认真阅读 要区别其正确与错误，找出其不足的，补充其需要补充的地方。经过阅读和分析，发现文献上还没搞清楚的地方，就要对问题点进一步深入研究，把一个个问题解决了，就为论文的成文打下了坚实的基础。
